Ninu iwadi ti ẹkọ ti ara, awọn polypeptides pẹlu ọkọọkan gigun ni a maa n lo.Fun awọn peptides pẹlu diẹ sii ju 60 amino acids ni ọkọọkan, ikosile pupọ ati SDS-PAGE ni gbogbogbo lo lati gba wọn.Sibẹsibẹ, ọna yii gba akoko pipẹ ati pe ipa iyasọtọ ọja ikẹhin ko dara.
Awọn italaya ati awọn solusan fun iṣelọpọ peptide gigun
Ninu iṣelọpọ ti awọn peptides gigun, a wa ni idojukọ nigbagbogbo pẹlu iṣoro kan, iyẹn ni, idinaduro steric ti ifasilẹ condensation pọ si pẹlu ilosoke ti ọkọọkan ninu iṣelọpọ, ati pe akoko ifarahan nilo lati tunṣe lati jẹ ki iṣesi naa pari.Bibẹẹkọ, akoko ifarabalẹ to gun, awọn ipa ẹgbẹ diẹ sii ni a ṣejade, ati pe ipin kan ti peptide ibi-afẹde ti ṣẹda.Iru awọn iṣẹku - awọn ẹwọn peptide aipe jẹ awọn aimọ bọtini ti a ṣe ni iṣelọpọ peptide gigun.Nitorinaa, ninu iṣelọpọ ti peptide gigun, iṣoro bọtini ti a gbọdọ bori ni lati ṣawari awọn ipo ifaseyin ti o ga ati awọn ọna ifa, nitorinaa lati jẹ ki iṣesi ifunmọ amino acid ni kikun ati kikun.Ni afikun, dinku akoko ifarabalẹ, nitori pe akoko ifasẹyin gun, diẹ sii awọn aati ẹgbẹ ti a ko le ṣakoso, diẹ sii ni idiju nipasẹ awọn ọja.Nitorinaa, awọn aaye mẹta wọnyi ni akopọ:
Ṣiṣepọ Microwave le ṣee lo: Fun diẹ ninu awọn amino acids ti o ba pade ninu ilana iṣelọpọ ti ko rọrun lati ṣepọ, iṣelọpọ microwave le ṣee lo.Ọna yii ni awọn abajade iyalẹnu, ati dinku akoko ifarahan pupọ, ati pe o dinku iṣelọpọ ti awọn ọja bọtini meji.
Ọ̀nà àkópọ̀ àjákù le ṣee lo: Nigbati diẹ ninu awọn peptides ni o ṣoro lati ṣajọpọ nipasẹ awọn ọna iṣelọpọ ti o wọpọ ati pe ko rọrun lati di mimọ, a le gba gbogbo condensation ti ọpọlọpọ awọn amino acids ni apakan kan ti peptide si pq peptide lapapọ.Ọna yii tun le yanju ọpọlọpọ awọn iṣoro ni iṣelọpọ.
Ṣiṣepọ Acylhydrazide le ṣee lo: acylhydrazide kolaginni ti peptides ni a ọna ti ri to-alakoso kolaginni ti N-terminal Cys peptide ati C-terminal polypeptide hydrazide kemikali yiyan lenu laarin awọn Ibiyi ti amide bonds lati se aseyori peptide imora ọna.Da lori ipo ti Cys ninu pq peptide, ọna yii pin gbogbo pq peptide sinu awọn ọna pupọ ati ṣajọpọ wọn lẹsẹsẹ.Nikẹhin, peptide ibi-afẹde ni a gba nipasẹ ifaseyin ifun omi-alakoso.Ọna yii kii ṣe pupọ dinku akoko iṣelọpọ ti peptide gigun, ṣugbọn tun pọ si mimọ ti ọja ikẹhin.
Gigun peptide mimo
Iyatọ ti awọn peptides gigun laiseaniani yori si awọn paati eka ti awọn peptides robi.Nitorinaa, o tun jẹ ipenija lati sọ awọn peptides gigun di mimọ nipasẹ HPLC.amyloid jara ti ilana iwẹnumọ polypeptide, gbigba iriri pupọ ati ni ifijišẹ lo ninu isọdi ti peptide gigun.Nipa gbigbe ohun elo tuntun, dapọ awọn ọna ṣiṣe isọdọmọ pupọ, iyapa tun ati awọn ọna iriri miiran, oṣuwọn aṣeyọri ti iwẹnumọ peptide gigun ti ni ilọsiwaju pupọ.
Akoko ifiweranṣẹ: Oṣu Kẹrin Ọjọ 18-2023